Les laboratoires du CNRS Occitanie Ouest dans la presse

Image : Modèle moléculaire d’assemblage du complexe de partition chez les bactéries © Jean-Yves Bouet

Figure : Illustration des systèmes de marquage d’ADN INT et images de microscopie de cellules de levures qui resectent les extremités de la cassure.

A gauche: afin de marquer une région chromosomique par le système parB/INT, il suffit d’intégrer la courte séquence d’ADN INT au locus génomique d’interet. Les protéines ParB1-mCherry et ParB2-GFP exprimées pas la cellule se fixent spécifiquement à INT et s’étalent autour. Ici on a marqué la région d’ADN à proximité d’un site de cassure double brin inductible par INT1. Après addition de galactose (étape: +Gal), la cassure est générée dans HO et la résection (conversion en simple brin) de l’ADN autour de la cassure sera déclenchée. La disparition des séquences INT entraine la disparition du focus INT1/ParB1-mcherry rouge permettant ainsi d’identifier les cellules uniques subissant un dommage à l’ADN.

A droite en haut: Visualisation des levures avec des régions d’ADN marquées par INT par microscopie en 3D et à fluorescence.

A droite en bas: Une levure marquée par INT1/ParB1-mCherry et INT2/ParB2-GFP. Le groupement des protéines autour des séquences INT formera un focus rouge pour INT1/ParB1-mCherry et vert pour INT2/ParB2-GFP. Le temps indiqué est celui après la cassure. Le focus rouge disparait à 14 minutes, le vert persiste. Les contrôles effectués démontrent que cette disparition du point fluorescent est due á la résection de INT-1 qui est convertie de double brin en simple brin. La barre d’échelle (en jaune) est de 2 micromètres.

© Bystricky/CNRS

Figure : Représentation schématique de l'appareil d'internalisation de l'ADN transformant chez le pneumocoque. Un pilus de transformation (a), issu de la polymérisation de la protéine ComGC, permet à l'ADNdb de se fixer à la surface des cellules (a,b) puis d'accéder au récepteur ComEA, requis pour le recrutement équatorial de l'endonucléase EndA (c). Images de microscopie électronique (a) et de microscopie à fluorescence (b,c). M, membrane ; EXT, extérieur ; CYT, cytoplasme. © LMGM, Jean-Pierre Claverys

Figure : La formation de mérodiploïdes stimulée par la transformation. (A) Intégration d’ADNsb transformant (R1-A) contenant une séquence répétée, R, suivie d’une séquence non-répétée, A, entre deux chromatides soeurs d’un chromosome en cours de réplication. R1 s’apparie de façon alternative avec R2, une séquence homologue localisée ailleurs sur le chromosome, et A s’apparie avec A sur l’autre chromatide. Z représente une séquence non-répétée en amont de R2. La région noire en gras représente la région entre R1 et R2qui va être dupliquée. (B) Dimère de chromosome formé par l'évènement de recombinaison dessiné dans le panneau A. R représente soit R1 soit R2, et A et Z sont les séquences non-répétées associées. RecFOR et XerS sont cruciaux pour la résolution de ces dimères de chromosome. La résolution des dimères de chromosome aboutit à la formation d’un chromosome contenant la région entre R1 et R2 dupliquée et un chromosome présentant une délétion de cette région.

© Patrice Polard

Figure : Modèle de la ségrégation du plasmide F d'Escherichia coli.

A) Positionnement des plasmides (en vert) dans le cytoplasme des bactéries observé en microscopie à fluorescence. 

B) Visualisation du comportement dynamique de la protéine motrice ParA (en jaune) dans une même bactérie au court du temps.

C) Cycle de l'ATP avec la protéine ParA. Les ronds de couleur représentent les différents changements conformationels de la protéine ParA, dont certains sont activés par la protéine ParB, soit directement, soit via l'activation de l'hydrolyse de l'ATP.

D) Modèle illustrant l'implication de l'hydrolyse de l'ATP dans la séparation des plasmides après réplication. © PLoS Genetics (2013)